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5Opentrons Flex PCR 工作站常見技術(shù)問題
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在生命科學研究領(lǐng)域,準確的蛋白質(zhì)濃度測定至關(guān)重要。Bradford 法憑借其操作簡便、靈敏度高等優(yōu)點,成為常用的蛋白質(zhì)定量方法之一。而 Opentrons Flex 作為先進的自動化移液工作站,能夠高效執(zhí)行 Bradford 法檢測流程。但在使用過程中,試劑交叉污染問題可能影響檢測結(jié)果的準確性與可靠性。因此,了解并有效避免試劑交叉污染十分關(guān)鍵。
一、試劑交叉污染的多樣來源
首先,移液操作是主要風險點。若移液器吸頭未正確更換,殘留的上一種試劑可能混入下一個樣本,導致交叉污染。尤其是在高通量檢測中,96 通道移液器同時處理多個樣本,一旦有吸頭污染,影響范圍廣泛。其次,實驗器具清潔不到位也會引發(fā)污染。如微孔板、試劑槽等若未徹底清洗和消毒,先前殘留的試劑會干擾后續(xù)檢測。再者,實驗環(huán)境中的氣溶膠也可能攜帶試劑成分,沉降到樣本或試劑中造成污染。
二、移液環(huán)節(jié)的污染防控策略
在 Opentrons Flex 系統(tǒng)中,移液環(huán)節(jié)的把控是避免污染的關(guān)鍵。要確保移液器吸頭的正確使用,使用一次性吸頭,每完成一次移液操作就及時更換,避免重復使用。而且,要選用質(zhì)量可靠的吸頭,其密封性和適配性良好,能有效防止液體殘留和泄漏。Opentrons Flex 的移液器配備智能傳感器,具備自動校準、實時定位和錯誤檢測功能,可保障移液精準度,降低因移液誤差導致的交叉污染風險。同時,在程序設(shè)置中,合理安排移液順序,避免不同試劑間的交叉接觸。
三、實驗器具的清潔與消毒規(guī)范
對于實驗器具,嚴格的清潔與消毒必不可少。每次實驗結(jié)束后,將微孔板、試劑槽等放入合適的清潔劑中浸泡,然后用蒸餾水徹底沖洗,去除殘留試劑。之后,采用高溫高壓消毒或化學消毒劑消毒的方式,殺滅可能存在的微生物和殘留污染物。另外,在實驗前,要仔細檢查器具是否有損壞或殘留雜質(zhì),確保其潔凈度符合實驗要求。
四、環(huán)境氣溶膠污染的應(yīng)對措施
為減少環(huán)境氣溶膠污染,可在實驗區(qū)域安裝空氣凈化設(shè)備,過濾空氣中的微小顆粒和污染物。同時,規(guī)范實驗操作,避免劇烈搖晃試劑瓶和移液器,減少氣溶膠的產(chǎn)生。Opentrons Flex 還可配備 HEPA/UV 模組,其集成高效微??諝膺^濾技術(shù)(HEPA)和 UV-C(254nm)消毒功能,能有效凈化工作區(qū)域內(nèi)的空氣,營造無菌環(huán)境,降低氣溶膠污染風險。
五、保障試劑質(zhì)量的關(guān)鍵要點
在 Bradford 法檢測中,使用高質(zhì)量的試劑也很重要。要選擇可靠的試劑供應(yīng)商,確保考馬斯亮藍 G-250 等試劑的純度和穩(wěn)定性。同時,按照正確的方法配制和儲存試劑,避免試劑變質(zhì)或被污染。
通過對移液操作、實驗器具、實驗環(huán)境以及試劑等方面的嚴格把控,能有效避免 Opentrons Flex 在 Bradford 法檢測中的試劑交叉污染,為生命科學研究提供準確可靠的實驗數(shù)據(jù)。
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