在生命科學(xué)實(shí)驗(yàn)中，利用 Opentrons Flex 搭配 BioTek 讀板器進(jìn)行吸光度檢測時(shí)，精準(zhǔn)配置參數(shù)是獲取可靠數(shù)據(jù)的關(guān)鍵。以下從準(zhǔn)備工作、設(shè)置步驟到問題解決，詳解配置要點(diǎn)。

移液工作站

一、配置前的必要準(zhǔn)備

1. 設(shè)備連接與狀態(tài)檢查
   確保 Opentrons Flex 與 BioTek 讀板器通過 USB 或以太網(wǎng)接口正確連接 。開機(jī)后，在 Opentrons Flex 操作界面確認(rèn)讀板器是否被識別。若未識別，檢查連接線與接口；同時(shí)查看讀板器內(nèi)部，確保濾光片安裝正確、無污漬，光路暢通。
2. 明確實(shí)驗(yàn)需求
   根據(jù)實(shí)驗(yàn)類型（如蛋白定量、細(xì)胞增殖檢測）確定所需波長，像蛋白定量常用 280nm，MTT 法檢測細(xì)胞增殖選 570nm 。同時(shí)，明確樣本預(yù)期吸光度范圍、孔板類型（96 孔板或 384 孔板），為參數(shù)設(shè)置提供依據(jù)。
3. 設(shè)備校準(zhǔn)
   定期使用標(biāo)準(zhǔn)品或校準(zhǔn)板對 BioTek 讀板器校準(zhǔn) 。嚴(yán)格遵循操作手冊，確保標(biāo)準(zhǔn)品使用規(guī)范，記錄校準(zhǔn)數(shù)據(jù)。若校準(zhǔn)偏差大，聯(lián)系供應(yīng)商維修調(diào)試。

二、吸光度檢測參數(shù)配置

1. 選擇檢測模式
   在 Opentrons Flex 控制軟件的讀板器參數(shù)界面，按需選擇檢測模式 。單波長檢測適用于單一特征波長樣本；雙波長檢測可消除背景干擾；全波長掃描則用于光譜分析，獲取寬范圍吸光度信息。
2. 設(shè)置波長參數(shù)
   單波長檢測時(shí)，輸入實(shí)驗(yàn)波長（如 DNA 濃度測定用 260nm），并利用軟件校準(zhǔn)功能微調(diào) 。雙波長檢測需設(shè)定主波長（樣本特征吸收波長）與參比波長（扣除背景）。全波長掃描要設(shè)置掃描范圍（200 - 800nm）和波長間隔（常規(guī)分析可選 10 - 20nm） 。
3. 調(diào)整其他檢測參數(shù)
   告知軟件孔板類型，圈選實(shí)際檢測孔位，設(shè)置邊緣補(bǔ)償參數(shù) ，校正孔板邊緣與中心光程差異導(dǎo)致的誤差。讀數(shù)時(shí)間可根據(jù)樣本特性延長，確保信號穩(wěn)定；積分時(shí)間需平衡靈敏度與檢測時(shí)長，低吸光度樣本可適當(dāng)延長。每個(gè)孔測量次數(shù)設(shè)為 2 - 3 次，計(jì)算平均值降低隨機(jī)誤差。
4. 保存與驗(yàn)證
   完成參數(shù)設(shè)置后命名保存，便于重復(fù)使用 。正式檢測前，用質(zhì)控樣本或?qū)φ諛颖绢A(yù)實(shí)驗(yàn)，對比結(jié)果與已知值，偏差超允許范圍（如 ±5%）則需重新調(diào)整參數(shù)。

三、常見問題處理
檢測結(jié)果異常時(shí)，先排查樣本制備是否有誤，再核對參數(shù)設(shè)置 。若樣本與參數(shù)無誤，可能是設(shè)備故障，如濾光片損壞、光源強(qiáng)度下降，需專業(yè)維修。遇到軟件通信中斷，檢查連接線，查看設(shè)備驅(qū)動是否正常，更新或重裝驅(qū)動，確保設(shè)備軟件版本兼容。

通過規(guī)范準(zhǔn)備、精準(zhǔn)設(shè)置參數(shù)和及時(shí)處理問題，可充分發(fā)揮設(shè)備性能，為實(shí)驗(yàn)提供可靠的吸光度檢測數(shù)據(jù)。

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