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隨著磁珠技術(shù)在DNA提取、RNA純化、NGS建庫等生命科學(xué)領(lǐng)域的普及,磁力架已成為分子實驗中的核心設(shè)備之一。其中,環(huán)形磁力架因其360°對稱磁場設(shè)計、適配多孔板的能力,成為高通量移液實驗中的理想選擇。那么,如何規(guī)范使用環(huán)形磁力架進行移液實驗?本文將從準備、操作、注意事項等方面詳細解讀,助你提升實驗效率與數(shù)據(jù)準確性。
一、環(huán)形磁力架的基本結(jié)構(gòu)與優(yōu)勢
環(huán)形磁力架(Ring Magnetic Stand)通常由多個環(huán)狀排列的高強度磁鐵組成,能夠快速將懸浮在溶液中的磁珠吸附至管壁或孔板邊緣。其主要優(yōu)點包括:
磁場均勻,可實現(xiàn)360度無死角吸附;
高適配性,適合96孔PCR板、1.5ml離心管;
自動化兼容性好,可集成至Opentrons、Hamilton等液體工作站。
這種磁力架特別適合對時間、重復(fù)性要求高的樣本前處理工作。
二、實驗前的準備工作
選擇合適的磁力架尺寸與類型:確保與你所使用的板型(PCR板、深孔板)匹配;
檢查磁力架狀態(tài):避免有磁鐵松動或磁力減弱;
準備磁珠試劑與吸頭:使用廠家推薦的磁珠,準備低吸附吸頭以防液體殘留;
設(shè)定好移液程序參數(shù)(手動或自動):確保吸液高度不觸碰磁珠區(qū)域。
三、環(huán)形磁力架的標準操作流程
第一步:加入樣品和磁珠
將樣品液和磁珠均勻混合后加入反應(yīng)孔中?;靹蚍椒òㄝp吹打或使用自動搖勻模塊。確保磁珠充分與目標物結(jié)合。
第二步:放置于環(huán)形磁力架上吸附
將板放入磁力架中,靜置2-5分鐘,讓磁珠充分吸附。理想情況下,磁珠會被吸附在孔壁一側(cè),液體則較為清澈。
第三步:移除上清
使用移液器輕柔地將液體從孔中移出,吸頭應(yīng)靠近液面、避免觸碰磁珠團。對于自動化平臺,設(shè)定吸液高度和速度至安全范圍(如保留1-2mm緩沖距離)。
第四步:洗滌步驟
加入洗滌液(如70%乙醇),輕混后再次吸附。重復(fù)吸附和上清移除2-3次,以徹底去除雜質(zhì)。每次洗滌后都需更換吸頭,防止交叉污染。
第五步:目標物洗脫
移除最后一次洗滌液后,短暫風(fēng)干(避免過干),加入洗脫緩沖液,將磁力架移開,使磁珠重新懸浮,混勻提取目標物。
四、注意事項與常見問題
避免磁珠殘留:操作中吸頭不應(yīng)深入接觸磁珠區(qū)域,建議設(shè)置安全吸液高度;
防止干珠:洗滌后勿長時間風(fēng)干磁珠,否則影響洗脫效率;
檢查磁力架清潔度:使用后應(yīng)清理表面殘液,防止腐蝕或磁珠沉積;
定期檢測磁力:磁力減弱會導(dǎo)致吸附不完全,可用高斯計檢測或觀察磁珠吸附速度判斷。
五、自動化平臺中的環(huán)形磁力架應(yīng)用
現(xiàn)代實驗室常將環(huán)形磁力架集成至自動化液體處理流程,如Opentrons Flex、KingFisher平臺等。自動化使用時建議:
設(shè)定磁吸時間充足(通常大于180秒);
配合“tip touch”、“slow aspirate”等參數(shù)優(yōu)化吸液流程;
定期校準板位與移液高度,確保吸頭精準避開磁珠。
通過軟件控制磁吸時間與吸液路徑,可顯著提高重復(fù)性與實驗成功率。
環(huán)形磁力架憑借其獨特結(jié)構(gòu),在磁珠實驗中提供了高效、均勻的吸附能力。正確使用環(huán)形磁力架進行移液實驗,不僅可以顯著提升分離效率,還能降低實驗誤差。通過規(guī)范的操作流程、細致的參數(shù)設(shè)定與定期維護管理,實驗人員可以充分發(fā)揮磁珠技術(shù)的優(yōu)勢,保障下游分析結(jié)果的準確可靠。
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