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在現(xiàn)代實驗室中,自動移液系統(tǒng)正逐步替代傳統(tǒng)手動操作,提升實驗效率與數(shù)據(jù)一致性。Opentrons 推出的 OT2 自動移液工作站,因其開源、易用和高性價比而深受全球科研機構(gòu)和生物實驗室歡迎。然而,想要充分發(fā)揮 OT2 的性能,準確完成實驗操作,正確地進行初始設(shè)置與全面校準是關(guān)鍵第一步。
本篇文章將深入講解如何完整設(shè)置和校準 OT2,從開箱到完成移液精度校正,幫助用戶輕松上手,確保 OT2 穩(wěn)定、高效運行,尤其適合首次使用該平臺的實驗人員參考。
一、為什么 OT2 的校準至關(guān)重要?
OT2 是一款高度精密的自動化移液設(shè)備,工作依賴于機械控制與傳感器系統(tǒng)對空間、液體體積及操作節(jié)奏的準確把握。因此,即使出廠前已經(jīng)過預(yù)設(shè)參數(shù),用戶在自己的實驗臺上使用 OT2 前仍需重新校準,以適配所在實驗室的耗材、臺面水平及具體實驗設(shè)置。
良好的校準能夠確保:
吸頭與耗材對準精確,避免偏移或撞擊;
每次移液準確執(zhí)行設(shè)定體積;
多輪實驗中移液重復(fù)性穩(wěn)定;
高通量實驗中樣本分布均勻、一致;
避免因位置誤差或滴液不全帶來的實驗失敗。
由此可見,OT2 的校準不僅僅是推薦步驟,更是穩(wěn)定運行的基礎(chǔ)保障。
二、OT2 設(shè)置流程:從開箱到啟動
確保設(shè)備完整性并連接電源
首次打開 OT2 包裝,請確認包含以下組成:主機本體、吸頭安裝器、USB 和電源線、吸頭支架、吸頭等實驗耗材。連接電源后,按下 OT2 右側(cè)的電源按鈕,設(shè)備將進入初始化模式,頂部環(huán)形燈亮起。
安裝 pipette(移液模塊)
根據(jù)實驗需求,在 OT2 安裝單通道或 8 通道 pipette。使用 Opentrons App 或手動按鈕控制機械臂,按照說明插入 pipette,并進行固定。
需注意左右安裝順序和匹配正確型號,例如:右側(cè)只能安裝 GEN2 P300 單通道,左側(cè)對應(yīng) GEN2 P20 等。
連接控制軟件
可通過 USB 或局域網(wǎng)將 OT2 連接至電腦。啟動 Opentrons App,自動搜索并連接設(shè)備。此時,OT2 將顯示在界面上,可進入“設(shè)備”頁面進行后續(xù)設(shè)置。
三、OT2 校準的三個關(guān)鍵步驟
OT2 的校準流程包含以下核心步驟,每一步都直接關(guān)系到移液精度與操作安全。
Deck 校準(甲板校準)
Deck 是 OT2 工作平臺上的樣本和耗材放置區(qū)域。校準 deck 可以確保設(shè)備機械臂能準確移動到每一個位置(稱為 deck slot)。
在軟件中點擊“Calibrate Deck”;
安裝空 tip rack,在指定 deck 位中放置;
通過軟件控制 pipette 下移至 tip rack 頂部邊緣;
精細微調(diào)坐標,直到吸頭剛好接觸表面;
系統(tǒng)記錄該位置作為基準點。
完成此步驟后,OT2 將能正確識別工作臺上每一個 deck 位的位置。
Pipette Offset 校準(機械臂偏移校準)
即使安裝正確的 pipette,不同批次、不同長度的 pipette 也可能存在機械臂末端微小偏移。因此需要單獨校準 pipette offset。
在系統(tǒng)中選擇已安裝 pipette;
放置 tip rack 和 labware(如反應(yīng)板);
裝上吸頭并下移至 tip rack 最下層吸頭邊緣;
再移動至 labware 表面,確保 tip 垂直貼合;
系統(tǒng)保存 XYZ 坐標作為 pipette offset。
該步驟確保移液頭能垂直、安全地插入耗材中,不發(fā)生歪斜或漏液。
Tip Length 校準(吸頭長度校準)
不同品牌或批次的吸頭實際長度存在偏差,校準 tip length 可避免誤差積累。
安裝對應(yīng) pipette 和 tip;
控制 pipette 下降至吸頭與校準卡片平齊;
精細調(diào)節(jié)高度,直到 tip 剛好接觸卡片;
系統(tǒng)記錄此 tip 長度。
經(jīng)過此步驟,OT2 能夠準確識別吸頭在 XYZ 軸上的實際長度,確保移液動作上下精準。
四、校準后檢查與維護建議
完成上述三步校準后,建議用戶:
運行一個預(yù)設(shè) protocol(如分液測試),確認 pipette 工作正常;
觀察吸液和排液過程,是否有殘留或氣泡;
查看是否存在撞擊或錯位現(xiàn)象,必要時重新校準;
每月進行一次復(fù)查校準,或每次更換耗材品牌/批次后重新設(shè)置。
此外,注意保持 OT2 的機械臂潔凈,防止液體揮發(fā)或污染影響軌跡傳感器。軟件升級后,也需關(guān)注是否需重新進行校準。
良好設(shè)置是 OT2 穩(wěn)定運行的前提
OT2 自動移液工作站為實驗室?guī)砹饲八从械淖詣踊c靈活性,但只有在完成嚴謹設(shè)置與精準校準之后,其性能才能真正發(fā)揮。OT2 的設(shè)置和校準雖然步驟較多,但流程標準清晰,配合 Opentrons App 和可視化界面,操作過程對新手也極為友好。
科學(xué)地完成 OT2 的設(shè)置和校準,不僅能提升實驗成功率,也能最大程度保障實驗數(shù)據(jù)的可重復(fù)性與可靠性。
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