在基因編輯技術(shù)迅速發(fā)展的今天，CRISPR 實(shí)驗(yàn)因其高效、精準(zhǔn)的特點(diǎn)，已成為分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室的核心工具。而為了提升實(shí)驗(yàn)的可重復(fù)性與通量，越來(lái)越多的研究者開(kāi)始引入移液工作站來(lái)自動(dòng)化處理 CRISPR 實(shí)驗(yàn)流程。本篇文章將為您詳解如何在 CRISPR 實(shí)驗(yàn)中有效部署移液工作站，助力實(shí)驗(yàn)效率與準(zhǔn)確度的全面提升。

移液工作站

一、為什么 CRISPR 實(shí)驗(yàn)需要移液工作站？
CRISPR 實(shí)驗(yàn)涉及多個(gè)微量液體操作步驟，包括向細(xì)胞中遞送 CRISPR-Cas9 復(fù)合物、進(jìn)行轉(zhuǎn)染試劑混合、建庫(kù)、qPCR 檢測(cè)等，每一步對(duì)移液精度和重復(fù)性要求極高。傳統(tǒng)人工移液容易引入批間誤差、操作疲勞，且難以滿足高通量需求。而移液工作站可以通過(guò)自動(dòng)化、高一致性的方式處理復(fù)雜液體操作，是實(shí)現(xiàn) CRISPR 流程標(biāo)準(zhǔn)化與規(guī)?；年P(guān)鍵工具。
CRISPR 實(shí)驗(yàn)中部署移液工作站的典型流程

sgRNA 合成與轉(zhuǎn)染前準(zhǔn)備
使用移液工作站對(duì)多個(gè) sgRNA 模板進(jìn)行并行合成與稀釋，并完成轉(zhuǎn)染緩沖液、Cas9 蛋白等組分的自動(dòng)分裝，大大減少人為誤差。

轉(zhuǎn)染混合體系準(zhǔn)備
在進(jìn)行細(xì)胞系轉(zhuǎn)染前，移液工作站可自動(dòng)完成 Cas9 與 sgRNA 的配比混合與復(fù)合，確保組分比例精確、操作重復(fù)性強(qiáng)。

樣本分組與回收
自動(dòng)將不同條件的實(shí)驗(yàn)體系分配到96孔或384孔板中，支持高通量樣本處理。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后還可實(shí)現(xiàn)自動(dòng)樣本收集與儲(chǔ)存轉(zhuǎn)移。

qPCR 檢測(cè)體系構(gòu)建
為檢測(cè)基因敲除或敲入效率，移液工作站能高效配置 qPCR 反應(yīng)體系，并將反應(yīng)液精準(zhǔn)分裝至孔板，大幅提升檢測(cè)效率。

二、如何選擇適配 CRISPR 實(shí)驗(yàn)的移液工作站？
在部署移液工作站前，應(yīng)重點(diǎn)關(guān)注以下幾個(gè)維度：
多通道靈活性：支持單通道與多通道切換，滿足多種實(shí)驗(yàn)通量需求
兼容耗材：支持 96 孔板、384 孔板、PCR 管、深孔板等多種實(shí)驗(yàn)容器
軟件簡(jiǎn)便性：是否具備圖形化流程編輯、邏輯操作友好、非程序員可輕松使用
精度與重復(fù)性：可控誤差小于 1%，符合分子實(shí)驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)
實(shí)驗(yàn)整合性：是否支持與其他實(shí)驗(yàn)?zāi)K（如熱循環(huán)儀、磁力架）聯(lián)動(dòng)操作
Opentrons 的 OT-2 或 Flex 平臺(tái)，作為目前市面主流的自動(dòng)化移液工作站，其開(kāi)放式生態(tài)與模塊化架構(gòu)非常適合搭建 CRISPR 自動(dòng)化流程。

三、部署建議與實(shí)操經(jīng)驗(yàn)
提前模擬實(shí)驗(yàn)流程，使用虛擬仿真功能測(cè)試腳本可靠性
將每個(gè)液體操作模塊標(biāo)準(zhǔn)化，便于后續(xù)重復(fù)利用
對(duì)粘性液體（如某些轉(zhuǎn)染試劑）設(shè)置合適的吸吐速率，避免誤差累積
建議每周對(duì)移液通道進(jìn)行校準(zhǔn)，確保長(zhǎng)期運(yùn)行精度
初期可從單步自動(dòng)化開(kāi)始，逐步擴(kuò)展為全流程整合方案

CRISPR 實(shí)驗(yàn)部署移液工作站是效率提升的關(guān)鍵一步
隨著基因編輯實(shí)驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)化和規(guī)?；l(fā)展，引入移液工作站已成為現(xiàn)代實(shí)驗(yàn)室的必然選擇。在 CRISPR 實(shí)驗(yàn)中部署自動(dòng)化平臺(tái)，不僅可以顯著提升樣本處理通量，還能極大降低人為誤差，為數(shù)據(jù)可靠性與實(shí)驗(yàn)效率保駕護(hù)航。如果你正計(jì)劃優(yōu)化實(shí)驗(yàn)流程，是時(shí)候?qū)⒁埔汗ぷ髡炯{入你的實(shí)驗(yàn)平臺(tái)架構(gòu)了。

相關(guān)閱讀推薦

什么是多通道移液？

高通量篩選（HTS）實(shí)驗(yàn)移液自動(dòng)化實(shí)戰(zhàn)經(jīng)驗(yàn)分享

細(xì)胞系傳代實(shí)驗(yàn)中如何部署移液工作站？

移液精準(zhǔn)度與重復(fù)性該怎么測(cè)量？

自動(dòng)移液工作站對(duì)非程序員友好嗎？

ELISA實(shí)驗(yàn)中的自動(dòng)移液場(chǎng)景與配置建議