常用的樣品鋪板方法

樣品鋪板方法有幾種，每種方法都有特定的用途，具體取決于實(shí)驗(yàn)?zāi)繕?biāo)：

劃線接種

目的：從混合樣本中分離出單個(gè)菌落。

操作步驟：使用接種環(huán)，按特定模式（通常為三至四個(gè)象限）將樣品涂抹在瓊脂表面。目的是稀釋樣本，以便在最后一個(gè)象限時(shí)，單個(gè)細(xì)胞分別沉積在瓊脂上，從而在培養(yǎng)后形成分離的菌落。

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傾注平板法

目的：與“涂布平板法”相同。

操作步驟：將一定量的液體樣本與熔化的瓊脂培養(yǎng)基混合，然后倒入培養(yǎng)皿中。瓊脂凝固后，微生物會嵌入其中，并在瓊脂表面和內(nèi)部形成菌落。

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點(diǎn)接種法

目的：用于檢測、比較生長研究或快速篩選。

操作步驟：在瓊脂平板表面放置少量不同的樣品作為單個(gè)斑點(diǎn)。這種方法可用于快速比較生長條件或同時(shí)檢查多個(gè)菌株或處理方法。

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涂布平板法

目的：計(jì)數(shù)樣本中的微生物數(shù)量或培養(yǎng)分離的菌落。

操作步驟：用移液管將一定量的液體樣本（通常是事先稀釋過的）吸到瓊脂平板的中央。使用無菌彎棒（通常是玻璃棒）或細(xì)胞擴(kuò)增器將樣品均勻地鋪滿整個(gè)瓊脂表面。

滴板法

目的：“點(diǎn)接種法”的一種變體，但體積較小。

操作步驟：在瓊脂平板上滴一小滴樣品（通常為 5-10 微升）。通常用于快速目測或檢測活力。

復(fù)制平板法

目的：將多個(gè)菌落從一個(gè)平板轉(zhuǎn)移到另一個(gè)平板，并保持相同的空間排列。

操作步驟：將裝有菌落的主平板壓在無菌絨布或類似材料上。然后將一個(gè)新的瓊脂平板壓在同塊天鵝絨上，將每個(gè)菌落中的一些細(xì)胞以相同的空間模式轉(zhuǎn)移到新的平板上。

為什么樣品鋪板很難？

1. 技術(shù)敏感性： 正確的分離和生長需要始終如一的溫和技術(shù)，以防止細(xì)胞或菌落受損。
2. 交叉污染： 始終存在從環(huán)境或其他樣本中引入污染物的風(fēng)險(xiǎn)。
3. 體積準(zhǔn)確性： 確保樣品的精確體積對于某些定量分析至關(guān)重要。