大家好，我是 Ethan，Opentrons的技術(shù)支持負責(zé)人。本期視頻是我們從開箱到協(xié)議運行系列視頻的第7期，上期視頻我?guī)Т蠹彝瓿闪宋^長度和移液器的偏移校準，接下來我將為大家講解如何上傳和運行協(xié)議，為此，我需要準備在協(xié)議運行中要使用的所有耗材，我準備了試管架、儲液槽和96孔板，我還需要盒裝吸頭和移液器，我的右側(cè)有一個P1000 單通道移液器，左側(cè)有一個 P20 8通道移液器，最后，在運行協(xié)議之前，我要先把垃圾簍放好，垃圾簍將保護金屬板免受任何在吸頭中掉落倒的液體的影響，為了在 0T-2 上運行協(xié)議，我需要將我的移液器連接上 OT-2，并完成甲板、吸頭長度和移液器的偏移校準。
　　
　　開始之前，我需要一個協(xié)議，我已經(jīng)用 Python API創(chuàng)建了一個用于本期視頻的協(xié)議，您可以在我們的在線協(xié)議庫中找到，協(xié)議的鏈接可以在視頻說明中查看到。這是一個很簡單的協(xié)議，運行內(nèi)容是從儲液槽中吸取液體分發(fā)到孔板中，我們進入應(yīng)用程序，導(dǎo)入一個協(xié)議，我將進入 Opentrons 應(yīng)用程序，導(dǎo)航到“協(xié)議”選項卡，這一步帶我們進入?yún)f(xié)議導(dǎo)入頁面，我可以通過拖放文件到應(yīng)用程序或選擇文件上傳來導(dǎo)入?yún)f(xié)議，我選擇選擇文件上傳選項，一個文件預(yù)覽窗口彈出，我可以選擇我已經(jīng)下載好的協(xié)議，當我導(dǎo)入?yún)f(xié)議之后，應(yīng)用程序?qū)⑼ㄟ^協(xié)議分析運行它，這是一個對協(xié)議進行本地模擬的過程，目的是獲取與元數(shù)據(jù)和實驗甲板布局圖相關(guān)的特定信息。

一旦協(xié)議被導(dǎo)入我就可以啟動運行，要做到這一點，我需要在協(xié)議選項卡中，然后我可以選擇3點菜單，點擊后顯示一個下拉菜單，從中選擇運行選項，所以這個列表中只有一個，如果我有多個 0T-2，我選擇這臺設(shè)備并點擊“進行設(shè)置”，然后就進入?yún)f(xié)議設(shè)置頁面，這個頁面提供我導(dǎo)入的協(xié)議的相關(guān)信息。如果您前面幾期視頻跟著我操作了，那您就知道我們完成了運行所需的設(shè)備校準。所以沒有必要重做第一步，如果沒完成校準，這里會有一個黃色的警告提示需要校準，我簡要介紹一下步驟2，實驗室器具設(shè)置，Opentrons 建議將此實驗室器皿設(shè)置作為協(xié)議設(shè)置的一部分，這一步驟主要涉及使用實驗室器具位置來檢查應(yīng)用或創(chuàng)建實驗室器具偏移，這些偏移是做小的調(diào)整，用于移液器定位到特定實驗室器具和特定實驗板位的正確位置。

由于我之前沒有在任何實驗室器皿上執(zhí)行過定位檢查，我可以繼續(xù)進行步驟2，正好讓我有機會向大家展示實驗室器具定位檢查是什么以及如何執(zhí)行。讓我們繼續(xù)進行實驗室器具定位檢查吧，我一點擊開始實驗室器具定位檢查，OT-2 就會把移液器移動到6號板位的 A1 吸頭，我需要定位所有噴嘴與第一列對齊，當 0T2 移動到吸頭架上，我需要確保所有噴嘴都處于企確的位置并對齊。如果通道沒有完全對齊，我可以點擊微調(diào)控制。我現(xiàn)在就開始調(diào)，因為移液通道存在略微偏離?，F(xiàn)在微調(diào)控制將顯示出來，我要快速調(diào)整我的移液器使其對齊。

現(xiàn)在我要確認位置，移液器將移動到5號板位，另一根移液器將降下來到達吸頭 A1?，F(xiàn)在我需要確保 P1000 移液器的噴嘴位于吸頭 A1 的中心，噴嘴與吸頭的頂部有一些永平方向的偏離。所以我要像之前一樣進行微調(diào)控制，稍微移動一下，一旦對齊好，我將單擊確認定位，拾起吸頭OT-2 將嘗試拾起吸頭，應(yīng)用程序會問我移液器是否成功地拾起了吸頭，它已經(jīng)拾起了 ，所以我點擊確認。它會移動到1號板位，吸頭應(yīng)該位于 A1孔的中心，并且吸頭的底部應(yīng)該與孔的頂部齊平。
　　
　　我要微調(diào)它，因為它有點偏離。所以，我再次需要微調(diào)控制吸頭定位到A1孔的中心，吸頭的底部與孔槽的頂部齊平。我要確認位置，并且移液器會移動到2號板位，它將移動到儲液槽的第一列，移液器將移動到儲液槽2的 A1 列中，現(xiàn)在我需要將吸頭對準A1列孔槽，并確保吸頭的底部與孔槽的頂部齊平。有一些偏低，所以我需要微調(diào)控制并稍微調(diào)整一下，吸頭在井 A1 孔槽居中，并且吸頭的底部與孔槽的頂部齊平。

所以我將確認位置并移動到3號板位，就像前兩個步驟一樣，它會移動到 A1 孔槽，現(xiàn)在我需要確保吸頭對準A1孔位，吸頭底部與孔槽的頂部齊平。已經(jīng)很不錯了，但我覺得還可以更好，所以我要微調(diào)控制并稍微調(diào)整一下。現(xiàn)在這個校準做得非常好，到這里我點擊確認定位，移液器將把吸頭放回5號板位的吸頭架上。它會把針頭放下，OT-2 會返回到初始位置。OT-2 復(fù)位了，說明實驗甲板定位檢查完成了。因為我的甲板地圖上都有綠色的勾選?，F(xiàn)在在我運行的每個實驗室器具的偏移量也在這里顯示出來了。所以我要關(guān)閉屏幕并應(yīng)用實驗室器具偏移數(shù)據(jù)，在這個DEC地圖上可以看到剛校準好的實驗室器具偏移數(shù)據(jù)，現(xiàn)在我回到協(xié)議設(shè)置選項卡，所有校準都完成了。我可以開始運行了，我們可以點擊開始。運行啟動！
　　
　　本期視頻到這里就結(jié)束了，讓 OT-2 繼續(xù)平靜地執(zhí)行協(xié)議。非常感謝您收看本系列的最后一期視頻。本期視頻總結(jié)了讓 OT-2 執(zhí)行協(xié)議所需的所有步驟，謝謝收看，再會！

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