人妻系列无码专区久久-国产一区二区 国产精品-日本中文字幕在线不卡视频-国产乱人伦AV在线A749

蛋白質結晶

從蛋白質溶液中形成蛋白質晶體的過程。然后利用 X 射線晶體學等技術來研究蛋白質的三維結構。

在蛋白質進入結晶狀態(tài)之前,它們通常處于溶液中的溶解狀態(tài)。在這種狀態(tài)下,蛋白質分子分散在整個溶劑(通常是水或緩沖溶液)中,可以自由移動,但仍可能保持原生的折疊結構。蛋白質結晶的目的是將這些分散的蛋白質分子從溶液中轉變?yōu)橛行虻墓虘B(tài)晶格排列,形成晶體。找到合適的條件(如濃度、pH 值、溫度以及某些鹽或其他分子的存在),促使蛋白質分子聚集在一起,形成這種有序的結構,從而促進這種轉變。


  1. 結晶前:蛋白質溶解在溶液中,沒有固體顆粒。蛋白質分子均勻地分散在整個液體中。
  2. 結晶過程中:隨著條件的變化(如由于蒸汽擴散),溶液中的蛋白質變得過飽和。這意味著溶液中的蛋白質濃度高于溶解狀態(tài)下的正常濃度。此時,蛋白質分子開始聚集在一起,并以有序的重復模式排列,形成固態(tài)晶體。
  3. 結晶后:系統(tǒng)由懸浮在剩余液體溶液中的固態(tài)蛋白質晶體組成。晶體不僅僅是固體顆粒,還具有內部有序結構。

蛋白質結晶的目的


蛋白質結晶是分子生物學中的一項關鍵技術,它使科學家能夠以原子分辨率觀察蛋白質。這種細致入微的觀察方式為生物學和醫(yī)學的各個方面提供了深刻的見解,包括:

  • 了解蛋白質的功能和機制:蛋白質的結構往往能揭示其功能。通過了解蛋白質中氨基酸的形狀和排列,研究人員可以推斷蛋白質如何與其他分子相互作用、如何發(fā)揮其功能以及如何調節(jié)其活性。
  • 藥物設計:許多藥物通過與蛋白質結合并調節(jié)其活性來發(fā)揮作用。了解蛋白質的精確結構有助于設計能更有效結合的新藥,從而達到更好的治療效果。這種方法被稱為基于結構的藥物設計。
  • 了解疾?。?/b>基因突變會導致蛋白質結構發(fā)生改變,進而改變功能。通過比較正常蛋白質和變異蛋白質的結構,研究人員可以深入了解許多疾病的分子基礎。
  • 生物技術應用:了解蛋白質結構有助于設計具有新功能的蛋白質,這些蛋白質可用于各種生物技術應用,如工業(yè)流程中的酶設計。
  • 進化洞察:比較不同物種的蛋白質結構可以深入了解蛋白質的進化過程和功能保護。

蛋白質結晶從未如此簡單

OT-2 是一款臺面式液體工作站,設計方便靈活,可自動處理許多常見應用。

觀看視頻

蛋白質結晶方法


蒸氣擴散

概述:蒸汽擴散是一種廣泛應用的蛋白質結晶方法,它依賴于蛋白質和沉淀劑的緩慢濃縮。當水從蛋白質溶液蒸發(fā)到儲層溶液時,蛋白質和沉淀劑的濃度就會增加。一旦溶液達到過飽和,晶體就會形成。

設置:無論是懸滴法還是坐滴法,都是將含有蛋白質溶液和沉淀劑混合物的液滴放置在含有較高濃度沉淀劑的儲液器附近。在懸滴法中,液滴被放置在一個倒置的蓋玻片上,蓋玻片密封在儲液器上。在坐滴法中,液滴位于儲液器上方密封井內的平臺上。

機制:隨著時間的推移,液滴中的水分蒸發(fā)并擴散到儲液器中。這種蒸發(fā)將蛋白質和沉淀物濃縮在液滴中,在有利條件下促進結晶。


批量結晶

概述:在這種方法中,蛋白質和沉淀劑直接混合在一起,系統(tǒng)不受干擾,讓晶體形成。

設置:在一個容器中將蛋白質溶液與沉淀劑溶液混合。

機制:當混合物中的條件變得有利時(通常是由于緩慢蒸發(fā)或由于蛋白質分子與沉淀劑之間的特殊相互作用),蛋白質分子開始聚集在一起并有序排列,形成晶體。


微量批量結晶

概述:這是“批量結晶”的一種變體,專為非常小的體積設計,以防止蒸發(fā)。

設置:將少量蛋白質和沉淀劑混合在一個孔中,然后用一層油(如石蠟油或硅油)覆蓋,以防止蒸發(fā)。

機制:油層確保液滴內的條件隨著時間的推移保持穩(wěn)定。沒有蒸發(fā)的影響,蛋白質和沉淀劑可以在受控條件下相互作用,從而在適當?shù)臈l件下實現(xiàn)結晶。

資源亮點

Opentrons 為 OT-2 和 Opentrons Flex 提供開源協(xié)議,幫助您實現(xiàn)蛋白質結晶的自動化。

蛋白質結晶為何困難?


  1. 蛋白質是復雜的分子,具有不同的表面、電荷和構象。
  2. 要為特定蛋白質的結晶找到合適的條件,無異于大海撈針。
  3. 輕微的雜質也會抑制結晶。
  4. 有些蛋白質本身具有柔韌性或多種構象,使其結晶具有挑戰(zhàn)性。

與手動相比,自動化處理蛋白質結晶的優(yōu)勢:


  1. 一致性和可重復性: 自動化可減少人為錯誤。
  2. 高通量: 自動化可同時測試數(shù)千種條件。
  3. 高效率: 自動化系統(tǒng)可全天候工作,加快流程。
  4. 節(jié)省資源: 使用較小的體積可減少所需的珍貴蛋白質樣本量。
  5. 數(shù)據(jù)管理: 自動化系統(tǒng)通常配有用于數(shù)據(jù)存儲和分析的集成軟件解決方案。

了解更多詳情

歡迎聯(lián)系我們,我們的專業(yè)應用科學家團隊將幫助您確認自動化實驗流程是否與您的需求適配。如果您有查看實驗流程運行的需求,可與我們預約線上Demo,與專家團隊深入討論您的實驗需求。

預約Demo
聯(lián)系我們

經(jīng)驗豐富的服務團隊和強大的生產(chǎn)支持團隊為客戶提供無憂的訂單服務。

請選擇語言