大家好，我是 Ethan，Opentrons的技術(shù)支持負(fù)責(zé)人。本期視頻是我們從開箱到協(xié)議運(yùn)行系列視頻的第7期，上期視頻我?guī)Т蠹彝瓿闪宋^長度和移液器的偏移校準(zhǔn)，接下來我將為大家講解如何上傳和運(yùn)行協(xié)議，為此，我需要準(zhǔn)備在協(xié)議運(yùn)行中要使用的所有耗材，我準(zhǔn)備了試管架、儲(chǔ)液槽和96孔板，我還需要盒裝吸頭和移液器，我的右側(cè)有一個(gè)P1000 單通道移液器，左側(cè)有一個(gè) P20 8通道移液器，最后，在運(yùn)行協(xié)議之前，我要先把垃圾簍放好，垃圾簍將保護(hù)金屬板免受任何在吸頭中掉落倒的液體的影響，為了在 0T-2 上運(yùn)行協(xié)議，我需要將我的移液器連接上 OT-2，并完成甲板、吸頭長度和移液器的偏移校準(zhǔn)。
　　
　　開始之前，我需要一個(gè)協(xié)議，我已經(jīng)用 Python API創(chuàng)建了一個(gè)用于本期視頻的協(xié)議，您可以在我們的在線協(xié)議庫中找到，協(xié)議的鏈接可以在視頻說明中查看到。這是一個(gè)很簡單的協(xié)議，運(yùn)行內(nèi)容是從儲(chǔ)液槽中吸取液體分發(fā)到孔板中，我們進(jìn)入應(yīng)用程序，導(dǎo)入一個(gè)協(xié)議，我將進(jìn)入 Opentrons 應(yīng)用程序，導(dǎo)航到“協(xié)議”選項(xiàng)卡，這一步帶我們進(jìn)入?yún)f(xié)議導(dǎo)入頁面，我可以通過拖放文件到應(yīng)用程序或選擇文件上傳來導(dǎo)入?yún)f(xié)議，我選擇選擇文件上傳選項(xiàng)，一個(gè)文件預(yù)覽窗口彈出，我可以選擇我已經(jīng)下載好的協(xié)議，當(dāng)我導(dǎo)入?yún)f(xié)議之后，應(yīng)用程序?qū)⑼ㄟ^協(xié)議分析運(yùn)行它，這是一個(gè)對(duì)協(xié)議進(jìn)行本地模擬的過程，目的是獲取與元數(shù)據(jù)和實(shí)驗(yàn)甲板布局圖相關(guān)的特定信息。

一旦協(xié)議被導(dǎo)入我就可以啟動(dòng)運(yùn)行，要做到這一點(diǎn)，我需要在協(xié)議選項(xiàng)卡中，然后我可以選擇3點(diǎn)菜單，點(diǎn)擊后顯示一個(gè)下拉菜單，從中選擇運(yùn)行選項(xiàng)，所以這個(gè)列表中只有一個(gè)，如果我有多個(gè) 0T-2，我選擇這臺(tái)設(shè)備并點(diǎn)擊“進(jìn)行設(shè)置”，然后就進(jìn)入?yún)f(xié)議設(shè)置頁面，這個(gè)頁面提供我導(dǎo)入的協(xié)議的相關(guān)信息。如果您前面幾期視頻跟著我操作了，那您就知道我們完成了運(yùn)行所需的設(shè)備校準(zhǔn)。所以沒有必要重做第一步，如果沒完成校準(zhǔn)，這里會(huì)有一個(gè)黃色的警告提示需要校準(zhǔn)，我簡要介紹一下步驟2，實(shí)驗(yàn)室器具設(shè)置，Opentrons 建議將此實(shí)驗(yàn)室器皿設(shè)置作為協(xié)議設(shè)置的一部分，這一步驟主要涉及使用實(shí)驗(yàn)室器具位置來檢查應(yīng)用或創(chuàng)建實(shí)驗(yàn)室器具偏移，這些偏移是做小的調(diào)整，用于移液器定位到特定實(shí)驗(yàn)室器具和特定實(shí)驗(yàn)板位的正確位置。

由于我之前沒有在任何實(shí)驗(yàn)室器皿上執(zhí)行過定位檢查，我可以繼續(xù)進(jìn)行步驟2，正好讓我有機(jī)會(huì)向大家展示實(shí)驗(yàn)室器具定位檢查是什么以及如何執(zhí)行。讓我們繼續(xù)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室器具定位檢查吧，我一點(diǎn)擊開始實(shí)驗(yàn)室器具定位檢查，OT-2 就會(huì)把移液器移動(dòng)到6號(hào)板位的 A1 吸頭，我需要定位所有噴嘴與第一列對(duì)齊，當(dāng) 0T2 移動(dòng)到吸頭架上，我需要確保所有噴嘴都處于企確的位置并對(duì)齊。如果通道沒有完全對(duì)齊，我可以點(diǎn)擊微調(diào)控制。我現(xiàn)在就開始調(diào)，因?yàn)橐埔和ǖ来嬖诼晕⑵x?，F(xiàn)在微調(diào)控制將顯示出來，我要快速調(diào)整我的移液器使其對(duì)齊。

現(xiàn)在我要確認(rèn)位置，移液器將移動(dòng)到5號(hào)板位，另一根移液器將降下來到達(dá)吸頭 A1?，F(xiàn)在我需要確保 P1000 移液器的噴嘴位于吸頭 A1 的中心，噴嘴與吸頭的頂部有一些永平方向的偏離。所以我要像之前一樣進(jìn)行微調(diào)控制，稍微移動(dòng)一下，一旦對(duì)齊好，我將單擊確認(rèn)定位，拾起吸頭OT-2 將嘗試拾起吸頭，應(yīng)用程序會(huì)問我移液器是否成功地拾起了吸頭，它已經(jīng)拾起了 ，所以我點(diǎn)擊確認(rèn)。它會(huì)移動(dòng)到1號(hào)板位，吸頭應(yīng)該位于 A1孔的中心，并且吸頭的底部應(yīng)該與孔的頂部齊平。
　　
　　我要微調(diào)它，因?yàn)樗悬c(diǎn)偏離。所以，我再次需要微調(diào)控制吸頭定位到A1孔的中心，吸頭的底部與孔槽的頂部齊平。我要確認(rèn)位置，并且移液器會(huì)移動(dòng)到2號(hào)板位，它將移動(dòng)到儲(chǔ)液槽的第一列，移液器將移動(dòng)到儲(chǔ)液槽2的 A1 列中，現(xiàn)在我需要將吸頭對(duì)準(zhǔn)A1列孔槽，并確保吸頭的底部與孔槽的頂部齊平。有一些偏低，所以我需要微調(diào)控制并稍微調(diào)整一下，吸頭在井 A1 孔槽居中，并且吸頭的底部與孔槽的頂部齊平。

所以我將確認(rèn)位置并移動(dòng)到3號(hào)板位，就像前兩個(gè)步驟一樣，它會(huì)移動(dòng)到 A1 孔槽，現(xiàn)在我需要確保吸頭對(duì)準(zhǔn)A1孔位，吸頭底部與孔槽的頂部齊平。已經(jīng)很不錯(cuò)了，但我覺得還可以更好，所以我要微調(diào)控制并稍微調(diào)整一下?，F(xiàn)在這個(gè)校準(zhǔn)做得非常好，到這里我點(diǎn)擊確認(rèn)定位，移液器將把吸頭放回5號(hào)板位的吸頭架上。它會(huì)把針頭放下，OT-2 會(huì)返回到初始位置。OT-2 復(fù)位了，說明實(shí)驗(yàn)甲板定位檢查完成了。因?yàn)槲业募装宓貓D上都有綠色的勾選?，F(xiàn)在在我運(yùn)行的每個(gè)實(shí)驗(yàn)室器具的偏移量也在這里顯示出來了。所以我要關(guān)閉屏幕并應(yīng)用實(shí)驗(yàn)室器具偏移數(shù)據(jù)，在這個(gè)DEC地圖上可以看到剛校準(zhǔn)好的實(shí)驗(yàn)室器具偏移數(shù)據(jù)，現(xiàn)在我回到協(xié)議設(shè)置選項(xiàng)卡，所有校準(zhǔn)都完成了。我可以開始運(yùn)行了，我們可以點(diǎn)擊開始。運(yùn)行啟動(dòng)！
　　
　　本期視頻到這里就結(jié)束了，讓 OT-2 繼續(xù)平靜地執(zhí)行協(xié)議。非常感謝您收看本系列的最后一期視頻。本期視頻總結(jié)了讓 OT-2 執(zhí)行協(xié)議所需的所有步驟，謝謝收看，再會(huì)！

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