大家好，我是 Ethan，Opentrons的技術(shù)支持負責人，本系列視頻是 0T-2從開箱到協(xié)議運行系列的第六期。在上期視頻中，我們完成了甲板校準，接下來讓我們開始在 OT-2 上進行吸頭長度校準，在吸頭長度和移液器偏移校準操作中，我需要用到校準鋁塊，我用到的吸頭有:20ul和1000ul的型號，我需要用到計算機和 OT-2，移液器已經(jīng)連接上OT2了，這一步在上期視頻已經(jīng)完成了，吸頭長度校準說明了吸頭如何適配特定物理移液器的噴嘴，只要校準完成，OT-2 就可以知道如何在協(xié)議運行時移液器的上下以及遠近移動，從而使吸頭保持在正確的高度，吸頭長度校準不用考慮各個吸頭之間的差異，OT-2 假定每個吸頭與同一型號的其他吸頭具有-致的長度，我將用到設備應用程序和 Opentrons 應用程序來啟動校準。

首先選擇我要校準的設備，只要我沒有完成校準，這里就會提示，提醒我完成移液器偏移校準或吸頭連接校準?，F(xiàn)在我點擊校準，當您第一次開始校準吸頭長度和移液器偏移的時候設備會詢問您是否需要用到校準鋁塊，如果您沒有校準鋁塊，您可以使用垃圾槽替代，我現(xiàn)在有這個鋁塊，所以我會用鋁塊來校準，我會點擊記住我的選擇以備下次使用，這樣它下次就不會提示了。

　　我將繼續(xù)使用校準塊，OT-2現(xiàn)在將回到起始狀態(tài)并為校準做好準備，我需要一個吸頭架，最好是 0pentrons 的，和一個校準鋁塊，我擺好了，讓我們開始校準。Opentrons 應用程序?qū)⒁龑彝瓿尚饰^長度校準，我需要把校準鋁塊和吸頭架擺在對應的板位上，移液器Z軸移動到校準塊以測量噴嘴，我需要向下移動移液器，以確保噴嘴與校準塊的距離小于1毫米，此時噴嘴距離校準塊不到1毫米，我會保存此校準結(jié)果，移液器將移至吸頭架中的第一個吸頭位置以拾取吸頭，我需要放下移液器，以確保移液器噴像APP士動畫展示的那樣對齊。

噴嘴已對齊，我要讓移液器拿起吸頭，我的移液器能夠拿起吸頭，單擊移動以測量吸頭長度按鈕，移液器將移回校準塊以測量吸頭長度，我需要將移液器移在一個小支架上，以確保它離校準塊的距離小于1毫米，噴嘴距離校準塊1毫米，現(xiàn)在我將保存吸頭長度設置，我將移除校準塊以繼續(xù)進行移液器偏移校準，移液器偏移權(quán)準補償兩個移液器之間的距離，基于 OT-2 和移液器的制造差異，每個移液器都有自己的移液器偏移量，我需要校準以確保最高精度的 OT-2 已經(jīng)附有吸頭，所以它將用于校準過程，該應用程序?qū)⒁龑彝瓿擅總€移液器的校準。移液器校準的過程與甲板校準類似，首先移動到插槽 5-以測量Z通道，然后我將移動它，使移液器與甲板的距離小于 0.1 毫米，z軸位置距離甲板小于1毫米，我將保存此校準，移液器將移動到板位1中的十字。

與甲板校準類似，我需要對齊移液器，使吸頭未端位于插槽1中十字的中間，我的一開始有點偏，慢慢移動，這樣就對齊了，我將移液器與十字對齊，現(xiàn)在可以保存校準，當“綠色鉤子”和移液器偏移完成消息出現(xiàn)時，說明校準完成了。我會讓移液器將吸頭放回吸頭架，然后繼續(xù)下一個校準，OT-2 現(xiàn)在復位了，到這里左支架上的 P20 移液器的吸買長度校準和偏移校準已完成，我現(xiàn)在要用 P1000 移液器執(zhí)行相同的過程。首先，我要把 20 μl吸頭架從甲板上拿下來，并把它放在一邊，我現(xiàn)在將在右側(cè)啟動吸頭長度校準和移液偏移校準。我進入設備頁面的時候可以看到，由于我之前沒有校準過右側(cè)的移液支架，有一條提示說我現(xiàn)在需要校準它，我現(xiàn)在點擊校準，
　　
　　應用程序會指導我如何進行吸頭長度和移液器偏移校準，和上次一樣，我需要與移液器相關(guān)聯(lián)的吸頭架，在這種情況下它是 1000 μl 吸頭架，我需要校準鋁塊，這些我都有，這次校準開始了，我需要將校準塊放在板位1中，在右側(cè)。然后我需要將吸頭架放在板位8中，和之前一樣，在板位8中取下頂部的吸頭架，校準鋁塊放在板位1中，我們現(xiàn)在可以確認放置并繼續(xù)校準，P1000 移液器將下降到校準鋁塊，就像之前的步驟一樣，我需要將它緩慢地移動下來，使噴嘴接近但不接觸到校準鋁塊，移液器噴嘴離校準鋁塊不到 0.1 毫米的距離了，我將保存這個設置，然后繼續(xù)拾起一個吸頭，我現(xiàn)在需要定位移液器，使其位于吸頭 A1的中心，移液器的噴嘴現(xiàn)在位于吸頭 A1 的中心，并且與吸頭的頂部齊平，我現(xiàn)在要讓移液器拿起那個吸頭，應用程序詢問我移液器是否能夠拾取吸頭，已經(jīng)成功拾取了，點擊確定，然后開始測量吸頭長度。

我們將移動到板位1中的校準塊，慢慢移動，使吸頭接近但不要接觸到校準鋁塊，完美！它現(xiàn)在停留在距離校準鋁塊不到 0.1毫米的距離，我現(xiàn)在將保存這個長度，現(xiàn)在吸頭長度已校準完成，應用程序上有一個“綠色鉤子”標記，我現(xiàn)在需要從甲板上取下校準鋁塊，并繼續(xù)進行移液器偏移校準，所以我會選擇繼續(xù)進行下一步操作，就像甲板校準和之前的移液器偏移校準一樣，我需要降低移液器，使其距離板位5中的甲板不到 0.1毫米，移液器吸頭已經(jīng)無限接近5號板位的甲板了，距離不到 0.1毫米。我將保存此校準結(jié)果，移液器將移動到第一個板位邊緣，我現(xiàn)在需要點擊移動機器人，直到吸頭正位于第一個板位中的十字中心?，F(xiàn)在吸頭精確地位于第一個板位的的十字上，保存校準結(jié)果，我知道移液器偏移校準已完成，因為屏幕上有一個“綠色鉤子”。我現(xiàn)在讓移液器將吸頭放回吸頭架并退出校準。OT-2復位，吸頭長度和移液器偏移校準已完成。
　　
　　在協(xié)議運行之前，我們本期視頻到此結(jié)束，感謝收看本系列的第六期，現(xiàn)在我已經(jīng)校準了移液器長度和移液器偏移量，接下來我們將繼續(xù)指導如何運行協(xié)議。感謝收看，我們下期再見！

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