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磁珠純化儀的操作方式可細分為精細的手動操作模式與高效的自動操作模式,每種模式均具備其獨特的操作流程與優(yōu)勢。接下來將分別介紹這兩種模式的不同操作方法:
一、手動操作模式
1、實驗準備:
1>確保磁珠充分分散:初次使用時,在渦旋振蕩儀上震蕩磁珠3分鐘,或使用其他方法使磁珠均勻懸浮。
2>準備樣本和試劑:將待純化的DNA或RNA樣本準備好,同時準備所需的裂解液、洗滌液和洗脫液等試劑。
2、樣本處理:
1>根據(jù)樣本類型進行預(yù)處理,如咽拭子樣本可直接使用,痰液樣本可能需要加入蛋白酶K并加熱處理。
2>將處理好的樣本加入到含有磁珠的試管或孔板中,并加入適量的裂解液和乙醇等試劑。
3、磁珠結(jié)合:
1>通過渦旋或顛倒混勻使磁珠與樣本中的核酸充分結(jié)合。
2>將試管或孔板置于磁力架上,使磁珠被磁力吸附,從而與溶液中的雜質(zhì)分離。
4、洗滌:
1>使用洗滌液洗滌磁珠,去除雜質(zhì)和未結(jié)合的核酸。此步驟可能需要重復(fù)多次,以確保洗滌效果。
2>每次洗滌后,將試管或孔板置于磁力架上,吸去洗滌液。
5、洗脫:
1>向試管或孔板中加入適量的洗脫液(如Buffer EB或去離子水),并輕輕吹打使磁珠重懸。
2>將試管或孔板置于室溫下孵育一段時間,使核酸從磁珠上洗脫下來。
3>再次將試管或孔板置于磁力架上,小心吸取上清液至新的離心管中,即為純化后的核酸樣本。
二、自動操作模式
對于配備有自動化控制系統(tǒng)的磁珠純化儀,操作通常更加簡便和高效。以下是一個典型的自動操作模式流程:
1、儀器準備:
1>打開磁珠純化儀的樣品倉,將磁棒套安裝到磁棒套筒支架上。
2>將試劑盒托盤拉出,將裝有磁珠、清洗液和洗脫液等試劑的試劑盒放到托盤上,然后將3>托盤推回儀器內(nèi)并關(guān)閉樣品倉。
2、樣品加載:
1>將待純化的樣本加入到試劑盒的指定位置。
3、啟動程序:
1>在磁珠純化儀的控制界面上點擊開始按鈕,儀器將自動進行樣品掃碼和識別。
2>掃碼完成后,儀器將按預(yù)定程序自動進行樣品純化操作,包括磁珠結(jié)合、洗滌和洗脫等步驟。
4、結(jié)果收集:
1>程序運行結(jié)束后,純化后的核酸樣本將被收集在試劑盒的指定位置或轉(zhuǎn)移到新的離心管中。
5、后續(xù)處理:
1>將收集到的核酸樣本進行后續(xù)實驗或保存?zhèn)溆谩?/p>
以上磁珠純化儀的操作方式僅作為參考,不同品牌和型號的磁珠純化儀在操作方法上可能有所差異,所以在實際操作中應(yīng)參考具體儀器的使用說明書進行操作。
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