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在藥物發(fā)現(xiàn)與分子篩選流程中,高通量篩選(HTS)實(shí)驗(yàn)作為核心環(huán)節(jié),承擔(dān)著對成千上萬化合物進(jìn)行快速、系統(tǒng)評估的任務(wù)。隨著篩選規(guī)模不斷擴(kuò)大、實(shí)驗(yàn)類型日益復(fù)雜,傳統(tǒng)的人工移液方法早已難以滿足對效率、準(zhǔn)確性與可重復(fù)性的高要求。
此時(shí),部署移液自動化系統(tǒng)成為現(xiàn)代實(shí)驗(yàn)室提升HTS實(shí)驗(yàn)質(zhì)量與效率的首選解決方案。本文將基于真實(shí)應(yīng)用經(jīng)驗(yàn),分享在高通量篩選實(shí)驗(yàn)中引入移液自動化的關(guān)鍵實(shí)踐與優(yōu)化建議,幫助科研人員實(shí)現(xiàn)真正高效、穩(wěn)定、可控的HTS流程。
一、為什么HTS實(shí)驗(yàn)必須邁向移液自動化?
高通量篩選實(shí)驗(yàn)涉及大量重復(fù)性移液操作,通常以96孔、384孔甚至1536孔微孔板為操作單位。在這樣的實(shí)驗(yàn)體系中,任何一點(diǎn)體積誤差或交叉污染,都可能導(dǎo)致結(jié)果偏差甚至數(shù)據(jù)廢棄。
相比人工移液,自動化移液系統(tǒng)在以下方面具有顯著優(yōu)勢:
高重復(fù)性和精度控制:預(yù)設(shè)體積和吸/放液參數(shù),確保每一孔樣本量一致。
加速實(shí)驗(yàn)進(jìn)程:支持并行多孔操作,一次運(yùn)行可完成數(shù)塊板的處理,效率顯著提升。
極低的交叉污染風(fēng)險(xiǎn):自動更換吸頭,或使用專用Tip Wash模塊,確保樣本純度。
易于流程集成與追溯:程序化記錄每一次操作步驟,便于QA追蹤和流程優(yōu)化。
二、HTS移液自動化的關(guān)鍵實(shí)戰(zhàn)經(jīng)驗(yàn)
明確篩選規(guī)模與實(shí)驗(yàn)類型,選擇合適平臺
不是所有自動移液系統(tǒng)都適合HTS實(shí)驗(yàn)。應(yīng)根據(jù)實(shí)驗(yàn)通量(孔板種類、每日篩選數(shù)量)、液體性質(zhì)(DMSO、PBS、細(xì)胞懸液等)、流程需求(添加、稀釋、分板等),選擇支持高通量、多模式操作的平臺。
統(tǒng)一吸液與分液參數(shù)設(shè)定,減少批間差異
自動移液系統(tǒng)可精準(zhǔn)控制吸放液速度、液面識別高度、吸頭預(yù)潤濕等關(guān)鍵參數(shù)。建議:
針對不同液體粘度(如含有DMSO或表面活性劑的緩沖液)設(shè)定專用參數(shù);
為不同板型建立標(biāo)準(zhǔn)化處理模板,確保一致性;
避免液體掛壁,可設(shè)置“掛壁補(bǔ)償”或“傾斜吸液”。
樣本混勻與反應(yīng)一致性控制
高通量篩選實(shí)驗(yàn)往往需要在孔板中完成反應(yīng)混勻。建議選擇具備:
Tip混勻功能(移液槍上下吹打);
震蕩模塊(在板位下方),以確保反應(yīng)物均勻分布,尤其適用于細(xì)胞或顆粒類樣品。
優(yōu)化移液路徑與動作邏輯,提升運(yùn)行效率
多數(shù)自動化平臺允許自定義路徑算法,通過“路徑最短”、“對稱操作”、“板塊分區(qū)”設(shè)置可大幅降低機(jī)械臂運(yùn)行時(shí)間。建議將多個(gè)操作步驟合并在一個(gè)流程模板中運(yùn)行,如:
預(yù)稀釋 → 樣本分發(fā) → 加入底物 → 混勻 → 傳輸至檢測平臺。
這樣不僅效率更高,也減少了中間人為干預(yù)帶來的變異。
三、避免常見誤區(qū):HTS移液自動化中的注意事項(xiàng)
忽略預(yù)實(shí)驗(yàn)測試
每次建立新HTS流程,應(yīng)先進(jìn)行至少3輪試運(yùn)行,檢測:
體積誤差范圍;
各孔重復(fù)性(可用CV值評估);
吸頭是否會掛液或產(chǎn)生氣泡。
軟件操作不熟悉
高通量篩選自動化并非“即插即用”,操作人員需熟悉流程編輯軟件,推薦培訓(xùn)2–3位骨干用戶熟練掌握平臺邏輯。
無交叉污染防控機(jī)制
若實(shí)驗(yàn)中有高低濃度梯度變化,應(yīng)啟用“每步更換吸頭”或設(shè)置多Tip庫切換,嚴(yán)防樣本擴(kuò)散。
實(shí)際應(yīng)用示例:HTS平臺中移液自動化的表現(xiàn)
面對分子篩選、藥物發(fā)現(xiàn)、生物反應(yīng)監(jiān)測等日益復(fù)雜的實(shí)驗(yàn)場景,HTS移液自動化已成為不可逆的趨勢。通過選擇合適平臺、建立標(biāo)準(zhǔn)化模板、精細(xì)化參數(shù)調(diào)試與嚴(yán)格過程管控,科研人員與實(shí)驗(yàn)室團(tuán)隊(duì)將實(shí)現(xiàn)真正意義上的高效、穩(wěn)定、低誤差篩選流程。
現(xiàn)在正是為您的HTS體系引入移液自動化的最佳時(shí)機(jī),它不僅是實(shí)驗(yàn)效率的提升,更是實(shí)驗(yàn)質(zhì)量保障與科研成果加速的基石。
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