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使用環(huán)形磁力架時(shí)如何避免磁珠殘留?

在分子生物學(xué)和高通量自動(dòng)化實(shí)驗(yàn)中,磁珠分離技術(shù)被廣泛用于DNA/RNA提取、蛋白純化和NGS建庫(kù)等流程。作為關(guān)鍵工具之一,環(huán)形磁力架因其360°磁場(chǎng)分布特性,能實(shí)現(xiàn)均勻高效的磁珠富集。然而在使用過(guò)程中,許多實(shí)驗(yàn)人員常遇到磁珠殘留在管壁、吸頭或反應(yīng)混合物中等問(wèn)題,影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的純凈度和重復(fù)性。那么,如何在使用環(huán)形磁力架時(shí)有效避免磁珠殘留?本文將為您提供實(shí)用指南與優(yōu)化建議。

移液工作站

一、什么是環(huán)形磁力架?
環(huán)形磁力架(Ring Magnetic Stand)是一種環(huán)形排布磁鐵的分離裝置,專(zhuān)為96孔板、PCR管或自動(dòng)化平臺(tái)設(shè)計(jì)。其優(yōu)點(diǎn)包括:
360度均勻磁場(chǎng):可快速吸附各個(gè)方向的磁珠;
支持高通量:適配多孔板,提升處理效率;
適合自動(dòng)化移液:配合液體工作站如Opentrons使用,標(biāo)準(zhǔn)化程度高。
盡管效率高,但不規(guī)范的操作可能導(dǎo)致磁珠無(wú)法完全收集,或部分殘留在液體中。

二、避免磁珠殘留的關(guān)鍵步驟
充分吸附,延長(zhǎng)磁吸時(shí)間
在磁力架上等待時(shí)間過(guò)短,是磁珠未完全沉降的主要原因之一。建議:
吸附時(shí)間至少2-3分鐘,具體視樣品量與磁珠類(lèi)型而定;
可輕輕拍打板底或離心幾秒,輔助磁珠靠近磁場(chǎng)區(qū)域;
注意觀察液面是否清澈,確保磁珠完全聚集后再吸取上清。
避免擾動(dòng)磁珠團(tuán)
在移除上清或添加液體過(guò)程中,吸頭若接觸磁珠區(qū)域易導(dǎo)致磁珠“掉隊(duì)”:
使用斜角吸頭,沿管壁吸取上清;
保持吸頭尖端距離磁珠團(tuán)1-2mm以上
若用自動(dòng)化移液程序,可設(shè)置“Approach Height”或“Aspirate Clearance”參數(shù)。
多次洗滌,減少殘留吸附
磁珠表面可能吸附雜質(zhì)或溶液成分。適當(dāng)增加清洗次數(shù)(如用70%乙醇清洗2次以上),有助于洗凈雜質(zhì)并減少殘留磁珠隨液體帶出。
清洗過(guò)程中不要?jiǎng)×掖荡?,以防擾亂磁珠位置;
清洗后應(yīng)充分吸干殘留液體,再繼續(xù)下一步反應(yīng)。
正確選擇移液體積和速度
殘留磁珠問(wèn)題常因移液過(guò)快或體積設(shè)置不合理導(dǎo)致。操作建議:
設(shè)置緩慢吸取速度,尤其是在靠近磁珠團(tuán)區(qū)域;
對(duì)于自動(dòng)移液器,建議使用“slow aspirate”或“tip touch”功能;
每次吸液后tip blow-out干凈,避免滴液帶出磁珠。

    三、實(shí)驗(yàn)結(jié)束后如何檢查磁珠殘留?
    在環(huán)形磁力架使用完畢后,可通過(guò)以下方式檢查是否存在磁珠殘留:
    用顯微鏡檢查吸頭內(nèi)壁和管底;
    將移出的上清放入新管中加磁力架觀察是否仍有磁珠聚集;
    對(duì)于自動(dòng)化平臺(tái),可在程序末尾加設(shè)一步“磁珠回收檢測(cè)”。
    如果殘留量較多,需調(diào)整程序參數(shù)或換用更適配的磁力架型號(hào)。

    四、小貼士:磁珠殘留的風(fēng)險(xiǎn)與影響
    降低純度:殘留磁珠進(jìn)入PCR或測(cè)序反應(yīng)會(huì)抑制酶活性;
    干擾定量:磁珠吸附熒光染料會(huì)影響濃度檢測(cè);
    堵塞移液通道:自動(dòng)化系統(tǒng)中,殘留磁珠可能堵住吸頭或流道,增加維護(hù)成本。
    因此,徹底防止磁珠殘留不僅是實(shí)驗(yàn)質(zhì)量問(wèn)題,也是設(shè)備安全與成本控制的重要環(huán)節(jié)。

    環(huán)形磁力架在磁珠操作中高效便捷,但使用時(shí)必須注意吸附時(shí)間、移液深度、清洗步驟和速度設(shè)置,才能有效避免磁珠殘留問(wèn)題。通過(guò)細(xì)節(jié)優(yōu)化,實(shí)驗(yàn)人員可獲得更干凈的樣品、更高的重復(fù)性,也能延長(zhǎng)自動(dòng)化設(shè)備使用壽命。

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