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NGS 建庫中如何部署自動移液工作站提高效率?

下一代測序(NGS, Next Generation Sequencing)技術(shù)已成為基因組學(xué)、轉(zhuǎn)錄組學(xué)、宏基因組學(xué)等領(lǐng)域的核心工具。NGS 建庫(Library Preparation)是整個測序流程中耗時、易出錯且對液體處理精度要求極高的環(huán)節(jié)。引入自動移液工作站(Automated Liquid Handling Workstation),不僅可以顯著提升通量與效率,還能降低人為誤差,保證數(shù)據(jù)質(zhì)量。
以下將從部署流程、效率提升機制、關(guān)鍵注意事項等方面,詳細解析在 NGS 建庫中如何科學(xué)應(yīng)用自動移液工作站。

NGS 建庫中如何部署自動移液工作站提高效率?

移液工作站

一、NGS 建庫流程與自動化切入點
典型的 NGS 建庫流程包括:
DNA/RNA 提取與定量
片段化(Fragmentation)
末端修復(fù)(End Repair)與加 A 尾(A-tailing)
接頭連接(Adapter Ligation)
純化與片段選擇(Bead-based Size Selection)
PCR 擴增
文庫定量與質(zhì)控
自動移液工作站可切入的核心環(huán)節(jié):
樣本分配(Sample Aliquoting)
酶反應(yīng)體系構(gòu)建
磁珠純化(Magnetic Bead Cleanup)
多輪洗滌與緩沖液更換
PCR 體系準備

二、部署自動移液工作站的效率提升機制
高通量并行處理
支持 96 孔、384 孔甚至更高通量格式,一次性處理數(shù)百個樣本,遠超人工移液速度。
精確液體分配
具備微升級(μL)甚至納升級(nL)精度,減少建庫試劑浪費,提升數(shù)據(jù)一致性。
減少人為誤差
自動化消除了因疲勞、移液不均勻、樣本標(biāo)簽混亂等造成的批間差異。
可編程與流程復(fù)用
通過軟件預(yù)設(shè) NGS 建庫 Protocol,一鍵執(zhí)行,重復(fù)實驗無需重新編程。
與磁珠純化模塊無縫銜接
集成磁力架模塊,自動完成 DNA 片段選擇與洗脫,減少操作時間。

三、部署策略與實施步驟
選擇合適的移液工作站
通道配置:1、8、96 通道可靈活組合(如 Opentrons Flex)。
模塊支持:需兼容加熱、制冷、磁珠純化等模塊。
體積范圍:支持 1 μL–1000 μL 的寬范圍分液。
開發(fā)與驗證建庫 Protocol
可直接調(diào)用開源 NGS 建庫協(xié)議(如 Illumina、NEB、KAPA 方案),并根據(jù)試劑品牌調(diào)整參數(shù)。
對關(guān)鍵步驟(加酶、磁珠清洗、洗脫)進行小批量測試與優(yōu)化。
試劑與耗材適配
選擇低吸附吸頭(Low Retention Tips)減少 DNA/RNA 損失。
采用 ANSI/SLAS 標(biāo)準板型,保證平臺兼容性。
人員培訓(xùn)與操作規(guī)范
確保操作人員熟悉設(shè)備校準、維護與故障排查流程。

四、效率與數(shù)據(jù)質(zhì)量雙提升的關(guān)鍵
批量一致性:自動化減少批間差異,使大規(guī)模測序項目(如全基因組關(guān)聯(lián)研究 GWAS)獲得更高的數(shù)據(jù)一致性。
試劑節(jié)約:精準分液可節(jié)省 10%-20% 高價值試劑(如接頭、酶)。
縮短周期:原本需 2–3 天的 96 樣本建庫流程,可在 6–8 小時內(nèi)完成。
可追溯性:系統(tǒng)自動記錄每一步操作參數(shù),方便質(zhì)量追溯與合規(guī)審查。

五、案例參考
Opentrons Flex + 磁珠提取模塊
在某基因組中心的 Illumina 建庫流程中,實現(xiàn)了 384 樣本/批 的全自動化,文庫產(chǎn)出均一度 CV < 5%,試劑成本降低 15%,總處理時間縮短 60%。

在 NGS 建庫中部署自動移液工作站,是提升實驗室高通量能力與數(shù)據(jù)質(zhì)量的有效途徑。合理選擇設(shè)備與模塊,優(yōu)化液體處理參數(shù),并結(jié)合磁珠純化等自動化單元,可以將人工操作的耗時、高差錯率環(huán)節(jié)轉(zhuǎn)化為高精度、可重復(fù)、可追溯的自動化流程。
未來,隨著開源協(xié)議庫與AI 驅(qū)動的實驗優(yōu)化算法的普及,自動移液工作站將在 NGS 建庫中實現(xiàn)更高程度的智能化與無人化,大幅提升科研與臨床測序的效率與可靠性。

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