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Opentrons Flex 核酸提取工作站怎么校準(zhǔn)

為了確保Opentrons Flex 核酸提取工作站這一先進(jìn)設(shè)備能夠持續(xù)準(zhǔn)確運(yùn)行,定期進(jìn)行校準(zhǔn)工作顯得尤為重要。本文旨在深入探討Opentrons Flex 核酸提取工作站的校準(zhǔn)流程,詳細(xì)闡述從校準(zhǔn)前的充分準(zhǔn)備,到執(zhí)行具體校準(zhǔn)步驟的每一個(gè)細(xì)節(jié),直至最終生成校準(zhǔn)記錄和報(bào)告的全過(guò)程。

Opentrons Flex 核酸提取工作站怎么校準(zhǔn)

Opentrons Flex 核酸提取工作站

一、校準(zhǔn)前準(zhǔn)備
1、確保環(huán)境條件:校準(zhǔn)應(yīng)在規(guī)定的環(huán)境溫度(10~30℃)和相對(duì)濕度(≤80%)下進(jìn)行,同時(shí)確保環(huán)境中沒(méi)有明顯的機(jī)械振動(dòng)和電磁干擾。
2、準(zhǔn)備校準(zhǔn)工具:
(1)超微量分光光度計(jì):用于測(cè)量核酸濃度,以驗(yàn)證提取效率。
(2)振動(dòng)測(cè)量?jī)x:用于測(cè)量和校準(zhǔn)工作站的振動(dòng)頻率。
(3)溫濕度巡檢儀:用于監(jiān)測(cè)和記錄環(huán)境溫度和濕度。
(4)電子天平:用于測(cè)量取液量的準(zhǔn)確性。

二、校準(zhǔn)步驟
1、溫度校準(zhǔn):
(1)使用溫度測(cè)量裝置,將溫度傳感器固定在提取儀的加熱模塊上,確保溫度傳感器與加熱模塊貼合緊密。
(2)根據(jù)提取儀的孔位數(shù),均勻選取測(cè)溫點(diǎn)。例如,孔位數(shù)48位96位時(shí)選7個(gè)測(cè)溫點(diǎn),8位48位時(shí)選5個(gè)測(cè)溫點(diǎn),8位及以下時(shí)選3個(gè)測(cè)溫點(diǎn)。
(3)設(shè)定被校提取儀的校準(zhǔn)溫度,穩(wěn)定10分鐘或以上,待溫度穩(wěn)定后,讀取測(cè)溫點(diǎn)的溫度值。
(4)計(jì)算溫度的示值誤差、均勻性和穩(wěn)定性。
2、振動(dòng)頻率校準(zhǔn):
(1)選取振動(dòng)頻率校準(zhǔn)點(diǎn),通常為提取儀頻率設(shè)定最大值的20%(低)、50%(中)、80%(高),或其他有實(shí)際需求的振動(dòng)頻率。
(2)使用振動(dòng)頻率測(cè)量裝置進(jìn)行測(cè)量,待提取儀穩(wěn)定5分鐘后,設(shè)定待測(cè)頻率值,分別測(cè)量低、中、高提取儀振動(dòng)頻率的示值。
(3)每個(gè)頻率測(cè)量3次,計(jì)算振動(dòng)頻率的示值誤差和穩(wěn)定性。
3、取液量校準(zhǔn):
(1)分別設(shè)定提取儀取液量為50μL、100μL、200μL,或其他有實(shí)際需要的取液量作為校準(zhǔn)點(diǎn)。
(2)測(cè)量取液量的示值誤差、重復(fù)性和一致性。
(3)重復(fù)性測(cè)試時(shí),選擇一個(gè)通道重復(fù)取液7次,用電子天平稱(chēng)量所取液體質(zhì)量,換算成體積后計(jì)算相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差。
(4)一致性測(cè)試時(shí),用提取儀的多通道取液器取液一次,分別稱(chēng)量各通道取液的質(zhì)量,換算成體積后計(jì)算取液量的一致性。
4、核酸提取回收率校準(zhǔn):
(1)選擇有證核酸標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),用微量分光光度計(jì)測(cè)量其濃度,取3次測(cè)量的平均值作為核酸提取前的初始濃度。
(2)用提取儀對(duì)有證核酸標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)進(jìn)行核酸提取。
(3)均勻選取測(cè)量點(diǎn)進(jìn)行一致性考察,將每個(gè)孔中提取好的核酸樣品溶液,分別用微量分光光度計(jì)測(cè)量其濃度。
(4)對(duì)比提取前后的核酸濃度,計(jì)算提取回收率及其一致性和重復(fù)性。

三、校準(zhǔn)記錄和報(bào)告
1、記錄校準(zhǔn)數(shù)據(jù):詳細(xì)記錄每一步校準(zhǔn)的數(shù)據(jù)和結(jié)果,包括溫度、振動(dòng)頻率、取液量和核酸提取回收率的測(cè)量值、計(jì)算值和誤差等。
2、生成校準(zhǔn)報(bào)告:根據(jù)記錄的校準(zhǔn)數(shù)據(jù),生成校準(zhǔn)報(bào)告,包括校準(zhǔn)日期、校準(zhǔn)人員、校準(zhǔn)設(shè)備型號(hào)和編號(hào)、校準(zhǔn)結(jié)果和結(jié)論等信息。
3、評(píng)估校準(zhǔn)結(jié)果:根據(jù)校準(zhǔn)報(bào)告,評(píng)估提取儀的性能是否滿足使用要求。如不滿足,需進(jìn)行必要的調(diào)整或維修。

Opentrons Flex 核酸提取工作站的校準(zhǔn)是一個(gè)系統(tǒng)而細(xì)致的過(guò)程,它涵蓋了從校準(zhǔn)前的準(zhǔn)備到具體步驟的執(zhí)行,再到校準(zhǔn)記錄和報(bào)告的生成等多個(gè)環(huán)節(jié)。通過(guò)嚴(yán)格的校準(zhǔn)流程,我們可以確保工作站的準(zhǔn)確性和可靠性,為后續(xù)的核酸提取實(shí)驗(yàn)提供堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。同時(shí),定期的校準(zhǔn)也是保持設(shè)備性能穩(wěn)定、延長(zhǎng)使用壽命的重要手段。

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