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處理復(fù)雜樣本別犯難!移液工作站這樣調(diào)參數(shù)更靠譜

在實驗室里,遇到 “難搞” 的樣本總讓人頭疼:粘稠的血漿像膠水一樣難吸,含細胞碎片的混懸液容易堵吸頭,揮發(fā)快的有機溶劑剛移完體積就變少…… 這些復(fù)雜樣本靠手工移液全憑經(jīng)驗,稍有不慎就出錯。其實,移液工作站只要調(diào)對參數(shù)、用對策略,再 “難纏” 的樣本也能輕松搞定。今天就來聊聊不同復(fù)雜樣本的應(yīng)對技巧,讓工作站變成你的 “智能幫手”。

處理復(fù)雜樣本別犯難!移液工作站這樣調(diào)參數(shù)更靠譜

移液工作站

一、高粘度樣本:慢一點,預(yù)濕潤更穩(wěn)當
很多人移取甘油、血清、蛋白溶液時,發(fā)現(xiàn)吸液體積總是比設(shè)定值少,這是因為高粘度液體流動慢,快速吸液會導(dǎo)致吸頭內(nèi)形成空泡。正確做法是:先在工作站軟件里把吸液速度調(diào)低—— 比如水相液體常用 50μL / 秒,粘稠液體調(diào)到 20μL / 秒以下,給液體足夠時間流入吸頭。同時打開 “預(yù)濕潤吸頭” 功能:讓吸頭先吸一次液體再排掉,相當于給吸頭 “涂一層保護膜”,第二次吸液時殘留量能減少 60%。
舉個例子,某實驗室處理 200cP 粘度的抗體溶液,一開始按默認參數(shù)移液,10μL 樣本實測只有 8.5μL。后來將吸液速度降到 15μL / 秒,預(yù)濕潤次數(shù)設(shè)為 2 次,誤差就縮小到 0.3μL 以內(nèi)。另外,如果工作站支持正壓置換式移液模式(活塞直接接觸液體),處理高粘度樣本時記得切換,比傳統(tǒng)空氣置換式更穩(wěn)定,尤其適合 10μL 以下的微量操作。

二、含顆粒 / 混懸液:防堵塞要 “軟硬兼施”
細胞懸液里的細胞團、磁珠提取液里的小顆粒,最容易堵住吸頭小孔。這時候需要從硬件和參數(shù)兩方面下手:硬件上選擇孔徑更大的吸頭(比如標有 “顆粒兼容” 的型號),或者給工作站加裝過濾裝置;參數(shù)設(shè)置上,吸液時讓吸頭深入液面下 5-8mm(比常規(guī)深 2-3mm),避免液面波動吸入空氣泡,排液時留 10% 的 “緩沖體積”—— 比如設(shè)定排液 100μL,實際只排 90μL,剩下的 10μL 帶著顆粒留在吸頭里,防止堵塞。
還有個小技巧:移取磁珠混懸液時,提前在工作站里添加 “震蕩步驟”—— 吸液前讓試劑架震蕩 5 秒,讓磁珠均勻分散,吸液過程中用 “間歇式吸液”(吸 10μL 停 0.5 秒再繼續(xù)),避免顆粒沉積。某實驗室用這套方法處理含磁珠的核酸提取液,吸頭堵塞率從原來的 30% 降到 5%,再也不用頻繁暫停實驗清理吸頭了。

三、微量 / 易揮發(fā)樣本:精度優(yōu)先,細節(jié)為王
移取 1μL 以下的微量液體(如熒光染料、酶制劑),或者乙醇、DMSO 這類易揮發(fā)液體時,關(guān)鍵是減少 “看不見的損失”。首先選擇非接觸式移液模式(比如聲波移液),不用吸頭直接接觸液體,皮升級體積也能精準控制;如果設(shè)備不支持,就用空氣置換式的 “慢吸慢排” 模式,吸液后讓吸頭在液面停留 1 秒(防止液體掛壁),排液時接觸孔板內(nèi)壁緩慢推出,殘留量能控制在 0.1μL 以下。
易揮發(fā)液體的 “隱形殺手” 是溫度和空氣暴露時間。移液前把試劑放在帶溫控的模塊里(比如 25℃恒溫),減少揮發(fā);在工作站軟件里勾選 “最小化空移時間”,讓機械臂走最短路徑,縮短吸頭暴露在空氣中的時間。實測移取 DMSO 時,這套操作能讓體積誤差從 5% 降到 1.5%,再也不用擔(dān)心因為揮發(fā)導(dǎo)致實驗數(shù)據(jù)波動了。


四、深孔板 / 不規(guī)則容器:液面監(jiān)測是 “眼睛”
處理深孔板(孔深超過 20mm)或者離心管、錐形瓶等不規(guī)則容器時,靠默認參數(shù)很容易吸空或觸底。這時候一定要打開工作站的激光液面檢測功能:它會像 “掃描儀” 一樣,先自動探測每個孔的液面高度,再調(diào)整吸頭下降深度。比如檢測尿液樣本時,不同孔的液面可能相差 3-5mm,液面監(jiān)測能讓吸頭精準停在液面下 2mm 處,既吸到足夠液體,又避免吸到孔底的沉淀。
如果工作站沒有激光檢測,也可以用 “壓力感應(yīng)法”:吸液時讓活塞緩慢下降,當壓力傳感器檢測到液體阻力(即吸頭接觸液面),立即停止下降并開始吸液。雖然速度稍慢,但能避免傳統(tǒng) “固定深度吸液” 的盲目性,尤其適合初次使用的新規(guī)格耗材。

五、特殊場景:提前 “摸底”,定制流程
遇到從未處理過的樣本(比如新研發(fā)的納米顆?;鞈乙海?,別急著直接上程序,先做個 “預(yù)實驗”:用工作站的 “單通道測試” 功能,分別嘗試不同的吸液速度(10μL/s、20μL/s、30μL/s)和排液停頓時間(0.1 秒、0.3 秒、0.5 秒),用天平稱量實際移液體積,找到誤差最小的組合。比如某實驗室研發(fā)脂質(zhì)納米粒時,通過預(yù)實驗發(fā)現(xiàn)吸液速度 25μL/s、排液后停頓 0.2 秒,能讓 10μL 樣本的誤差穩(wěn)定在 ±0.2μL。
另外,復(fù)雜樣本往往需要 “組合操作”:比如移取細胞懸液時,先低速吸液保護細胞,再高速排液減少殘留;處理有毒樣本時,在程序里加入 “吸頭自動丟棄” 和 “紫外消殺” 步驟,避免手動接觸風(fēng)險。現(xiàn)代工作站的軟件大多支持自定義流程,把這些特殊需求編進程序,下次直接調(diào)用,再復(fù)雜的樣本也能 “一鍵搞定”。

處理復(fù)雜樣本的核心原則是 “因材施教”:高粘度樣本靠速度和預(yù)濕潤,顆粒樣本靠防堵和震蕩,微量樣本靠精度和細節(jié),深孔板靠液面監(jiān)測。每次遇到新樣本,花 10 分鐘做個預(yù)實驗,記錄最佳參數(shù),慢慢就能積累出一套專屬的 “復(fù)雜樣本處理方案”。記住,工作站不是冰冷的機器,而是能根據(jù)你的需求 “靈活變通” 的助手,摸透它的 “脾氣”,再難的樣本也能輕松應(yīng)對,實驗效率自然越來越高!

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